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笃玛 花椒毒酚 产品介绍

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详细说明

    花椒毒酚

1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀

释。

48μmol/L 5 号标准品 150μl 的原倍标准品加入150μl 标准品稀释液

24μmol/L 4 号标准品 150μl 的5 号标准品加入150μl 标准品稀释液

12μmol/L 3 号标准品 150μl 的4 号标准品加入150μl 标准品稀释液

6μmol/L 2 号标准品 150μl 的3 号标准品加入150μl 标准品稀释液

3μmol/L 1 号标准品 150μl 的2 号标准品加入150μl 标准品稀释液

2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品*终稀释度为5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。

4. 配液:将30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水30 倍稀释后备用

5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30 秒后弃去,如此重复5 次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

7. 温育:操作同3。

8. 洗涤:操作同5。

9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10 分钟.

10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

11. 测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止液后15 分钟以内进行。









花椒毒酚

注意事项

1. 当混合蛋白溶液时应尽量轻缓,避免起泡。

2. 洗涤过程非常重要,不充分的洗涤易造成假阳性。

3. 一次加样时间*控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

4. 请每次测定的同时做标准曲线,*做复孔。

5. 如标本中待测物质含量过高,请先稀释后再测定,计算时请*后乘以稀释倍数。

6. 在配制标准品、检测溶液工作液时,请以相应的稀释液配制,不能混淆。

7. 底物请避光保存。

8. 不要用其它生产厂家的试剂替换试剂盒中的试剂。















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计算

以标准物的浓度为横坐标(对数坐标),OD值为纵坐标(普通坐标),在半对数坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD

值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。

 
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